核酸提取_核酸提取纯化_DNA/RNA提取

核酸具有贮存和传递遗传信息等重要生物功能，是分子生物学研究的主要对象。采用常规吸附柱法抽提样本中的DNA、RNA，为下游实验提供高纯度和高浓度的模板。

DNA提取方法：对基因组DNA的提取方法主要有 CTAB，SDS和其他如玻璃珠法，酶法等。质粒DNA的提取主要有碱裂解法和煮沸法;线粒体，叶绿体DNA的提取主要有差速离心结合SDS法。

RNA提取方法：DNA和RNA在特定pH下溶解度不同而分别于体系的中间相与水相，得以分离。进行有机溶剂抽提，沉淀，得到纯净RNA。

样品类型及样品需求

动物组织：单个样品>0.1g，2mlEP管或冻存管装，不要过量;样本应尽量新鲜，如不能立即提取蛋白或核酸，应液氮速冻后冻存于-80℃或更低，冻存样本避免反复冻融以致降解

种子样本：去壳新鲜或保存于液氮中的的种子样本，单个样品>0.2g

贴壁/悬浮细胞：1. 总RNA或蛋白：106cell/指标、浆/核RNA或蛋白：107cell/指标、线粒体RNA或蛋白：2*107 cell/指标，样本尽量新鲜，细胞收取后直接加Trizol(QPCR检测)或直接冻存于-80℃

2. 若细胞处理(加药、转染、感染)后状态差应酌情加大收样量

全血/血清样品：用抗凝管保存的外周血 5~10ml，骨髓 1~3ml; -80℃保存不超半周的白细胞匀浆>400μl，每 400μl 加入 400μl Trizol。

石蜡包埋样品：由标准的石蜡包埋盒包埋的石蜡块，有效厚度大于 0.1cm; 新鲜的 FFPE 组织切片，每片厚度不超过 10μm，2~8 张，表面积不超过 250mm2。

抗体样本

1. 按样本种属提供满足相应实验要求的抗体；

2. 按抗体说明书要求寄送，尽量避免分装;如分装，确保量足够进行实验，并提供抗体说明书；

3.保存抗体的抗体管上应有能够识别此抗体的标记，抗体的量应大于实验所需的量。

引物：干粉，≥1OD，如进行预实验，每个基因至少提供两对引物， 附带公司引物合成单。